很多镜头如MP-E 65mm F/2.8 1-5X 会给出景深数值。

如下表

当您使用1X倍率，使用F/2.8进行堆叠拍摄时，单张的景深时0.396mm，但一般建议可将步长设置在大于0.2mm左右，确保每一张之间有景深重叠的部分。以达到较优的画质。

在后期处理时，也可以通过软件查看步长是否合适。

以Helicon focus为例

堆叠所有照片处理后，在软件主窗口，点击保存。

此时出现下图

选择“保存景深图”

此时软件会生成一张灰阶的图片。如果灰阶过度自然，则选用的景深合适。反之，则选用的步长略大，需要减小。详见下图比较。

当您使用显微目镜时，步长参数可以参考下表（图片来源，尼康http://www.microscopyu.com/articles/formulas/formulasfielddepth.html ）